快速眼动睡眠剥夺对中枢5羟色胺缺失小鼠Orexin神经元活性的影响

西安第四军医大学唐都医院神经科（710038）  邹慧丽  赵广宇  宿长军

【摘要】 目的 观察在中枢5羟色胺神经元缺失的基因敲除小鼠(Pet1-Cre/Lmx1b flox/flox CKO小鼠)中,快速眼动睡眠剥夺(SD)对下丘脑Orexin神经元活性的影响。 方法 中枢5羟色胺神经元缺失的基因敲除小鼠是利用条件性敲除技术（condition knockout）特异性剔除5羟色胺神经元发育所必需的转录因子Lmx1b获得的。实验小鼠分为4组：野生型小鼠（C57/B6）对照组、野生型小鼠睡眠剥夺组、CKO小鼠对照组、CKO小鼠睡眠剥夺组。采用小平台水环境法给予睡眠剥夺组小鼠8h快速眼动睡眠剥夺，免疫组织化学法检测实验各组Orexin神经元数量、Orexin/c-fos双重标记神经元数量，以此判断在CKO小鼠中，快速眼动睡眠剥夺对Orexin神经元活性的影响。 结果 CKO小鼠睡眠剥夺前后Orexin神经元数量未见明显差别，与野生型小鼠相比亦未见统计学差别；在正常睡眠状态下（对照组），CKO小鼠Orexin/c-fos双标神经元数量与野生型小鼠相当，但睡眠剥夺后明显低于野生型小鼠睡眠剥夺组（P<0.01），与CKO小鼠对照组数量相当（P>0.05）。 结论 在CKO小鼠中，Orexin神经元活性在8h快速眼动睡眠剥夺后没有提高，其结果证明作为维持觉醒的重要神经递质5羟色胺的缺失可能降低了中枢神经系统的觉醒水平，致使睡眠剥夺不能提高促发和维持觉醒的神经肽Orexin的活性,提示在Orexin激活包括５羟色胺在内的上行激活系统维持觉醒和５羟色胺抑制Orexin活性的双向调控中，５羟色胺的促觉醒作用占主导地位。

【关键词】5羟色胺  睡眠剥夺  Orexin  基因敲除小鼠